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    一文帶您詳細了解核酸轉染試劑

    更新時間:2023-09-11 點擊量:243
      核酸轉染試劑是用于將外源核酸引入細胞內的重要實驗方法。通過該試劑,研究人員可以將外源核酸(如質粒DNA、RNA等)轉染到目標細胞內,從而實現基因功能研究、基因治療和基因工程等多個領域的研究。利用轉染試劑與外源核酸的相互作用,使其形成一個穩定的復合物,進而可以被細胞攝入。一般來說,可以分為兩大類:脂質體轉染試劑和陽離子轉染試劑。
     
      脂質體轉染試劑采用了脂質體作為載體,脂質體由磷脂和輔助物質如膽固醇、PEG等組成。當脂質體與核酸混合后,可以形成一個核酸-脂質體復合物。這一復合物能夠與細胞膜相互結合,并且由于其與細胞膜的相似性,復合物可以被細胞攝入。一旦復合物進入細胞內,脂質體會與細胞膜融合,釋放出核酸分子,使之進入細胞質。這種方式適用于多種細胞類型,但對細胞毒性較高,轉染效率一般較低。
     
      陽離子轉染試劑則是利用帶正電荷的有機陽離子或無機陽離子與核酸相互作用,形成一個納米復合物。這個復合物具有良好的細胞攝入能力,因為細胞膜通常是帶負電荷的,與陽離子形成相互作用后,復合物能夠通過電荷吸引力進入細胞內。與脂質體轉染試劑相比,陽離子轉染試劑的轉染效率并不高,但優點在于轉染過程中細胞毒性較低。
      核酸轉染試劑
      核酸轉染試劑的操作使用步驟:
     
      1.實驗前,準備好所需的材料,包括細胞培養基、細胞培養器具等。
     
      2.將細胞培養至適當的濃度,并將其分配到培養皿中。
     
      3.準備核酸:將所需的DNA或RNA溶解在無菌的介質中,并溫和震蕩混合。注意避免氣泡的產生。
     
      4.向核酸樣品中加入適量的染試劑,并進行輕柔混合,然后靜置在室溫下短暫地孵育。
     
      5.將轉染試劑-核酸混合物緩慢地滴加到培養皿中,并輕輕搖晃培養皿,確?;旌衔锞鶆蚍植?。
     
      6.放置細胞在適當的條件下,進行培養和表達。
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